Atividade in vitro do extrato etanólico de própolis e do digluconato de clorexidina sobre as espécies de Candida isoladas da mucosa bucal de pacientes internados em Unidade de Terapia Intensiva (UTI) / In vitro activity of ethanolic extract of propolis and chlorhexidine digluconate on Candida species isolated from the oral mucosa of patients hospitalized in the Intensive Care Unit (ICU)

Avaliou-se a atividade dos extratos de própolis e digluconato de clorexidina em Candida sp isoladas da mucosa bucal de pacientes em UTI. Foram determinadas as concentrações fungicidas mínimas (CFM) e comparadas, nas doses sub-inibitórias, à produção de exoenzimas proteinase e fosfolipase e formação de franjas. Em 72 isolados foram avaliadas a atividade antifúngica pela técnica de microdiluição em série, na "base 2", a produção das exoenzimas proteinase e fosfolipase, e a formação de franjas, antes e após a exposição às própolis e clorexidina. Dos 72 isolados, 53 eram C. albicans, 11 C. tropicalis, quatro C. guilhermondii e quatro sugestivas de C. dubliniensis. CFM 90% do extrato de própolis foi de 5% para C. albicans, 20% C. tropicalis, 0,625% C. guilhermondii e 0,312% sugestivas de C. dubliniensis. CFM 90% da clorexidina foi de 0,0018% para C. albicans, 0,012% C. tropicalis, de 0,0018% C. guilhermondii e de 0,00375% sugestivas de C. dubliniensis. Ocorreu inibição das exoenzimas e franjas, em ambos os produtos. Apesar da inibição da clorexidina ser menor que a da própolis, seu uso diário não causa efeitos colaterais indesejáveis como manchas nos dentes e na língua, perda do paladar e sensação de queimação na mucosa bucal. (AU)

The activity of propolis extract and chlorhexidine digluconate on Candida sp isolated from oral mucosa of patients in ICU was evaluated. The minimum fungicidal concentrations (MFC) were determined, and also the production of proteinase and phospholipase exoenzymes and the fringe formation. Seventy-two isolates were used and identified by the API 20C AUX® System. The antifungal activity was evaluated by "at base 2" serial microdilution technique. Also the exoenzymes production (proteinase and phospholipase), the fringes formation, before and after being exposed to propolis and chlorhexidine, were analysed. Of 72 isolates, 53 were C. albicans, 11 C. tropicalis, four C. guilhermondii and four suggestive C. dubliniensis. The MFC 90% of propolis extract was 5% C. albicans, 20% C. tropicalis, 0.625% C. guilhermondii; and 0.312% suggestive of C. dubliniensis. MFC 90% of chlorhexidine was 0.0018% C. albicans, 0.012% C. tropicalis, 0.0018% C. guilhermondii and 0.00375% suggestive of C. dubliniensis. The inhibition of exoenzymes and fringes occurred in the both products. Although the inhibition of chlorhexidine is lower than that showed by propolis, its daily use neither cause undesirable side effects as blemishes on the teeth and tongue, nor the loss of the taste and the burning sensation in the oral mucosa. (AU)

Atividade in vitro do extrato etanólico de própolis e do digluconato de clorexidina sobre as espécies de Candida isoladas da mucosa bucal de pacientes internados em Unidade de Terapia Intensiva (UTI) / In vitro activity of ethanolic extract of propolis and chlorhexidine digluconate on Candida species isolated from the oral mucosa of patients hospitalized in the Intensive Care Unit (ICU)

Avaliou-se a atividade dos extratos de própolis e digluconato de clorexidina em Candida sp isoladas da mucosa bucal de pacientes em UTI. Foram determinadas as concentrações fungicidas mínimas (CFM) e comparadas, nas doses sub-inibitórias, à produção de exoenzimas proteinase e fosfolipase e formação de franjas. Em 72 isolados foram avaliadas a atividade antifúngica pela técnica de microdiluição em série, na “base 2”, a produção das exoenzimas proteinase e fosfolipase, e a formação de franjas, antes e após a exposição às própolis e clorexidina. Dos 72 isolados, 53 eram C. albicans, 11 C. tropicalis, quatro C. guilhermondii e quatro sugestivas de C. dubliniensis. CFM 90% do extrato de própolis foi de 5% para C. albicans, 20% C. tropicalis, 0,625% C. guilhermondii e 0,312% sugestivas de C. dubliniensis. CFM 90% da clorexidina foi de 0,0018% para C. albicans, 0,012% C. tropicalis, de 0,0018% C. guilhermondii e de 0,00375% sugestivas de C. dubliniensis. Ocorreu inibição das exoenzimas e franjas, em ambos os produtos. Apesar da inibição da clorexidina ser menor que a da própolis, seu uso diário não causa efeitos colaterais indesejáveis como manchas nos dentes e na língua, perda do paladar e sensação de queimação na mucosa bucal.

The activity of propolis extract and chlorhexidine digluconate on Candida sp isolated from oral mucosa of patients in ICU was evaluated. The minimum fungicidal concentrations (MFC) were determined, and also the production of proteinase and phospholipase exoenzymes and the fringe formation. Seventy-two isolates were used and identified by the API 20C AUX® System. The antifungal activity was evaluated by “at base 2” serial microdilution technique. Also the exoenzymes production (proteinase and phospholipase), the fringes formation, before and after being exposed to propolis and chlorhexidine, were analysed. Of 72 isolates, 53 were C. albicans, 11 C. tropicalis, four C. guilhermondii and four suggestive C. dubliniensis. The MFC 90% of propolis extract was 5% C. albicans, 20% C. tropicalis, 0.625% C. guilhermondii; and 0.312% suggestive of C. dubliniensis. MFC 90% of chlorhexidine was 0.0018% C. albicans, 0.012% C. tropicalis, 0.0018% C. guilhermondii and 0.00375% suggestive of C. dubliniensis. The inhibition of exoenzymes and fringes occurred in the both products. Although the inhibition of chlorhexidine is lower than that showed by propolis, its daily use neither cause undesirable side effects as blemishes on the teeth and tongue, nor the loss of the taste and the burning sensation in the oral mucosa.

Oral candidiasis in HIV+ patients under treatment with protease inhibitors

The purpose of this work was to evaluate the influence of Protease Inhibitors (PI) on the occurrence of oral candidiasis in 111 HIV+ patients under PI therapy (Group A). The controls consisted of 56 patients that were not using PI drugs (Group B) and 26 patients that were not using any drugs for HIV therapy (Group C). The patient's cd4 cell counts were taken in account for the correlations. One hundred and ninety three patients were evaluated. The PI did not affect the prevalence of oral candidiasis (p = 0.158) or the frequency of C. albicans isolates (p = 0.133). Patients with lower cd4 cell counts showed a higher frequency of C. albicans isolates (p = 0.046) and a greater occurrence of oral candidiasis (p = 0.036).

Adherence to HeLa cells, typing by killer toxins and susceptibility to antifungal agents of Candida dubliniensis strains

The aim of this study was to evaluate the adherence capability to HeLa cells, the susceptibility to killer toxins and the in vitro susceptibility to antifungal agents (eTest? method - AB Biodisk, Solna, Sweden) of 9 Candida dubliniensis isolates recovered from HIV+ and AIDS patients. The adherence test was strongly positive for strain ATCC 777 and positive for all other strains. Typing by killer toxins revealed two different biotypes among the 9 isolates studied: 888 and 688. Only biotype 688 (ATCC 777) was susceptible to the K2 toxin. There was a significant inverse correlation between adherence and killer toxin susceptibility (r = -0.8525 - p = 0.0035). No strains presented resistance to fluconazole, itraconazole, ketoconazole, voriconazole, flucytosine or amphotericin-B. With the exception of ATCC 777, all the other isolates presented similar behavior.

O objetivo do presente trabalho foi avaliar o comportamento de cepas de Candida dubliniensis recuperadas de pacientes HIV+ e com AIDS por meio da pesquisa de capacidade de adesão a células HeLa, susceptibilidade a toxinas "Killer" e resistência in vitro a antifúngicos (eTest® AB Biodisk, Solna, Suécia). O ensaio de adesão foi fortemente aderente para a amostra padrão ATCC 777, e aderente para os demais isolados. Os testes de tipagem das amostras frente às cepas-padrão produtoras de toxinas "Killer" mostraram dois biótipos diferentes dos 9 isolados estudados: 888 e 688. Somente o biótipo 688 (ATCC 777) de C. dubliniensis foi sensível à toxina K2. Houve correlação inversa significativa entre adesão e sensibilidade a toxinas "killer" (r = -0,8525 - p = 0,0035). Em relação à pesquisa de resistência a antifúngicos, as amostras de C. dubliniensis foram sensíveis ao fluconazol, itraconazol, cetoconazol, voriconazol, à flucitosina e anfotericina B. Com exceção da amostra ATCC 777, todas as demais mostraram comportamento similar.

Estudo comparativo com diversos fixadores para aplicação em microscopia eletrônica de transmissão / A comparative study on several fixatives applied in transmission electron microscopy procedure

Um estudo comparativo sobre a ação de diversos fixadores utilizados em microscopia eletrônica de transmissão (MET) e microscopia de luz (ML) foi realizado, a fim de analisar a preservação de estruturas celulares ao microscópio eletrônico de transmissão (MET). Fragmentos de fígado de camundongo foram fixados em 5 diferentes fixadores: o fixador de Karnovsky, glutaraldeído e paraformaldeído utilizados no processamento para MET e o formaldeído comercial e líquido de Bouin utilizados no processamento para ML. Após a fixação, os fragmentos foram pós-fixados com tetróxido de ósmio e contrastastados com acetato de uranila. A seguir foram desidratados e incluídos em resina Epon. Os cortes ultrafinos mostraram que os fragmentos fixados com Karnovsky e glutaraldeído apresentaram melhor preservação das estruturas celulares e menor extração. O paraformaldeído produziu alguns artefatos de má fixação e extração pelo fato de formar menos ligações cruzadas que o glutaraldeído. Os fixadores formaldeído comercial e o líquido de Bouin utilizados em microscopia de luz mostraram que não são adequados ao uso em MET, pois são considerados fixadores coagulantes e produzem extensa extração dos componentes celulares. Comparando-se as imagens obtidas com os fixadores utilizados, o fixador de Karnovsky e o glutaraldeído mostraram melhor preservação e maior similaridade na morfologia

O uso de equipamentos de proteção individual (EPIs) e coletiva (EPCs) nos acidentes ocorridos em um laboratório de saúde pública no período de maio de 1998 a maio de 2002 / Individual and collective protection equipments (IPE and CPE) wearing in a health public laboratory accidents from may 1998 to may 2002

A saúde dos trabalhadores tem merecido atenção do Sistema Nacional de Saúde e de organizações internacionais. Este estudo teve como objetivo avaliar os 38 acidentes registrados no período de maio de 1998 a maio de 2002 num laboratório de saúde pública, a relação com o não uso ou o uso inadequado de EPIs e EPCs pelos funcionários e a quantidade de horas trabalhadas pelos profissionais quando da ocorrência dos acidentes. Os dados foram obtidos nas fichas de registro de acidentes de trabalho elaboradas pelo grupo de biossegurança local e preenchidas durante entrevista com os acidentados. Os acidentes foram agrupados segundo a sua natureza, em cinco categorias: queimaduras (calor, frio, ácido); pérfuro-cortantes; amostras biológicas; transporte de amostras; incêndios. Foram registrados 38 acidentes envolvendo 30 pessoas, sendo: 7 casos (18,42 por cento) em 1998 (maio a dezembro); 10 (26,32 por cento) em 1999; 7 (18,42 por cento) em 2000; 7 (18,42 por cento) em 2001 e 7 (18,42 por cento) em 2002 (janeiro a maio). O acidente mais frequente (37 por cento) ocorreu com amostras biológicas, seguido pelos pérfuro-cortantes (24 por cento). Os EPIs estavam sendo utilizados de maneira incorreta ou incompleta em 22 dos acidentes relatados. Conclui-se, portanto, que é de fundamental importância a prevenção de acidentes frente a situações de risco em laboratório, e que a conscientização e responsabilidade na observação das normas de biossegurança envolve os profissionais em todos os níves

Experimental model of Candida Albicans (serotypes A and B) adherence In Vitro

The adherence of Candida albicans is considered an important virulence factor since it determines the colonization of the yeast in various regions of the host, being the initial cause of the infection. In this work we studied the adherence of C. albicans (serotypes A and B) to HeLa and Vero cells after culture for 18 h and 30 h in chemically defined medium (YNB) plus carbohydrate sources such as glucose, sucrose, maltose, galactose and mannose (500 mM). Each assay was performed in triplicate. The best results were obtained with the medium containing glucose. The adherence was greatest in 18 h cultures at 37§C and at 1 h contact time. The interaction of yeast cells with the host cells was studied by scanning microscopy.

Time course of virus-like particles (VLPS) double-stranded RNA accumulation in toxigenic and non-toxigenic strains of Aspergillus flavus

Two strains of Aspergillus flavus, non-toxigenic NRRL 6550 and toxigenic NRRL 5940, were studied over a period of 44 days, in order to detect the presence of virus-like particles (VLPs) by means of electron microscopy (EM) and nucleic acids electrophoresis. Only the toxigenic strain contained VLPs, presenting three-segmented dsRNA. An increase in VLPs number was observed during the exponential phase of fungal growth, up to day 12 of culture; after this, higher levels of aflatoxin production in toxigenic NRRL 5940 mycelia occurred in parallel with decreased VLPs replication.

Candida albicans byotipes isolated from the oral cavity of HIV-positive patients

Candida albicans tem sido frequentemente isolada de processos infecciosos de pacientes com doenças imunossupressoras, como a AIDS, e em indivíduos transplantados e/ou submetidos a antibioticoterapia prolongada. Os mecanismos de virulência pelos quais esta levedura expressa sua patogenicidade incluem: aderência, produçäo de enzimas extracelulares e habilidade de formar pseudomicélio, entre outras. A sorotipagem foi realizada pelo método de aglutinaçäo com soro momoespecífico (sorotipo A). A pesquisa das enzimas proteinase e fosfolipase foi realizada utilizando meio com soro albumina bovina (fraçäo V) e agar Sabouraud Dextrose e acrescido de gema de ovo. No sistema killer foram utilizadas 9 cepas padröes. A grande maioria das cepas estudadas foi sorotipo A (70 por cento). A produçäo das enzimas proteinase e fosfolipase foi positiva em 96 por cento e 90 por cento das amostras, respectivamente. Em relaçäo às toxinas killer, 10 diferentes tipos foram observados, sendo o biotipo 211 prevalente em 64,5 por cento das amostras estudadas

Mycological evaluation of filtrated juice of agrave sisalana perrine's leafe

Conforme observado por Salomäo e Purchio, 1982, o suco filtrado da folha de Agave sisalana apresenta substância inibitória do crescimento de Aspergillus flavus e Aspergillus parasiticus e em doses subnibitórias interfere na síntese de aflatoxinas. Seguindo esta linha de pesquisa, verificou-se esta atividade inibitória em amostras de milho contaminadas pelos fungos toxigênicos citados. Realizou-se testes demonstrando a eficiência dessa atividade em 3 amostras de A. parasiticus, de A. flavus e 3 de Aspergillus sp. Esterilizou-se as amostras de miho por óxido de etileno sendo posteriormente colocadas em erlenmeyer. As amostras foram umedecidas com suco e contaminadas por fungos toxigênicos. Evidenciou-se inibiçäo de crescimento nos experimentos realizados, demonstrando-se, assim, a possibilidade do emprego do suco filtrado de A. sisalana para tal finalidade. Foram realizadas avaliaçöes toxicológicas do suco para animais de laboratório

Rhodotorula Rubra em cabelos humanos simulando quadro de piedra branca / Similar white piedra by Rodotorula rubra

Resumo: Rhodotorula rubra é levedura oportunista, esando associada a uma variedade de processos patológicos no homem, é frequêntemente encontrada como contaminante da pele, pulmäo, urina, fezes e sistema nervoso central e com grande significado quando presente no sangue. As determinantes humanas causadas por Rhodotorula têm sido relatadasmas näo documentadas. O presente trabalho relata pela primeira vez em nosso meio, o isolamento desse microrganismo, como agente etiológico de infecçäo de cabelos humanos que ao exame clínico, simula pidra branca. Cabelos apresentando nódulos claros foram colhidos de paciente com 18 anos de idade. Em seguida classificados com KOH a 20 (por cento) entre lâmina e lamínula e observados no microscópio óptico comum e na microscopia eletrônicade varredura. Os cabelos foram semeados em ágar Sabnouraud-glicose contendo 200 mg/l de clonranfenicol, incubados à 25 graus C por 5 dias. Após o isolamento da levedura, a mesma foi identificada utilizando-se técnicas micológicas usuais. O exame microscópico dos pêlos infectados revelou em algumas regiöes o aumento do volume do cabelo, característico da tricorrexe nodosa. Em outras regiöes os pêlos já se apresentavam fragmentados e, com relativa facilidade podia-se observar leveduras arredondadas com brotamento em base estreita. A microscopia eletrônica de varredura pode-se observar mais detalhadamente a descriçäo acima. A levedura isolada foi identificada como Rhodotorula rubra, sem atividade lipolítica. É importante ressaltar que a referida levedura foi isolada repetidas vezes em cultura pura dos cabelos infectados. Este achado clínicoe laboratorial deve seer considerado, assim como deve merecer a devida atençäo dos pesquisadoresos isolamentos de R. rubra os quais permitiräo um correto diagnóstico micológico e terapêutico adequada (au)

Aspectos biológicos das fases filamentosa e leveduriforme de Scopulariopsis brevicaulis / Biological aspects of filamentosa phases and yeast of Scopulariopsis brevicaulis

Seis culturas de S. brevicaulis, em suas gases M e Y, foram estudadas quanto às suas características fisiológicas e de patogenecidade. As provas bioquímcas revelaram que as culturas näo produzem amido, näo reduzem nitrato a nitrito, näo fermentam a dextrose, hidrolizam a uréia, liquefazem a gelatina, reduzem o azul de metileno, produzem catlase e trimetilarsina. A hidrólise do amido e da caseina determinam diferenças fundamentais entre as duas fase do fungo: provas positivas para a fase M e negativas para a fase Y. A assimilaçäo de fontes carbonadas e nitrogenadas foram semelhantes para a fase Y. Camundongos irraidados e näo irradiados, foram inoculados experimetnalmente e separadamente com ambas as fases do fungo. Os primeiros aniamis morreram após 5-10 dias, apresentando à necrópsia quadro hemorrágico difuso e o corte histolófico dos órgäos revelou focos de infiltraçäo leucocitária, edema e congestäo dos vasos. O segundo grupos, foi sacrificado após 5 semanas e apresentou resultados semelhantes ao primeiro com relaçäo aos cortes histológicos. O fungo, na sua fase Y, foi observado microscopicamente ao exame direto do exudato peritoneal, dentro e fora de macrófagos

Etiologia bacteriana da mastite bovina no Estado de Säo Paulo, Brasil / Bacterial etiology of bovine mastitis in the State of Säo Paulo

Exames microbiológicos em 2533 amostras de leite procedentes de 32 propriedades de exploraçäo leiteira, de 18 municípios do Estado de Säo Paulo, Brasil, sendo 11,21% de amostras negativas ao exame microbiológico. Nas amostras positivas foram isolados: Staphylococcus sp. (49,23%); Streptococcus sp. (27,08%); Corynebacterium sp. (30,67%); Enterobacteriaceae (4,26%); Pseudomonas sp. (1,06%) e 5,64% correspondente a várias bactérias (Actinobacillus sp.; Moraxella sp.; Brucella sp.; Listeria sp.; Aeromonas sp.; Kurthia sp.; Alcaligenes sp.; Lactobacillus sp.; Chromobacterium sp.; Neisseria sp.; Acinetobacter sp.; Nocardia sp.; Streptomyces sp.). Fungos filamentosos e leveduras representaram 11,68%. Predominaram os isolamentos em cultura pura, mas foram registradas culturas mistas tanto de fungos como bactérias

Microbiota fungica na pelagem de camundongos de linhagens isogênicas e congênicas mantidos em biotério de criaçäo / Fungal microbiota of isogenic and congenic strains on nice in animal holding rooms

Com o desenvolvimento da tecnologia e do manejo de animais de Laboratório, mantidos em biotérios que seguem diferentes normas de trabalho, de acordo com os objetivos a que se propöem, é mister que se avalie a microbiota dos ambientes de criaçäo, bem como dos animais que deles fazem parte. Estudou-se a freqüência de fungos na pelagem de 95 camundongos (47 machos e 48 fêmeas de Linhagem isogênicas (A/Sn (10), Balb/c (16), CBA (15), C57BL/10J (10) e congênitas (B10. A (14), B10.d2/o (15) e B 10.D2/n, com idades que variavam entre 37 55 dias. A coleta de material foi realizada pela fricçäo de um pedaço de tapete esterilizado, em toda regiäo corpórea dos camundongos, seguida de compressäo do material em placas de Petri, contendo agar Sabouraud dextrose acrescido de coranfenicol (100 microng/ ml) - ASD e Mycobiotic agar' (MA), para o isolamento dos fungos. Verificou-s, maior número de isolamentos no primeiro (224) do que na segunda (61). As freqüências de isolamento foram, respectivamente: Penicillium sp (93,68%), Trichoderma sp (92,63%), Cladosporium sp (38,95%), torulapsis sp (7,37%, Rhizapus sp (4, 21%), Aureobasidium sp (3, 16%), Absidia sp (1,05%), Asperigillus sp (1,05%), Mycellia sterilia (1,05%), Trichotecium sp (1,05%), Candida sp (1,05%) e Rhadotorula sp (1,05%). Maior número de gênero fúngicos foi isolado de Linhagens isogênicas e de camundongos do sexo feminino. Estes resultados foram estatisticamente significativos para p = 0,05 na prova dos sinais. Entre os fungos isolados nos ambientes de criaçäo incluiram-se os seguintes gêneros Absidia, Aureobasidium. Cladosporium, Cepnalosporium, Ebicoccum, Geotrichum, Mycelia sterilia, Panicillium e Trichoderma. ªNäo foram encontrados fungos considerados patogênicos para as Linhagens estudadas, tanto nos animais como nas diferentes salas de criaçäo